細菌確認測試卡

 

細菌確認測試卡主要是以螢光方式來檢測細菌有無,檢測範圍包括大腸桿菌(E. Coli)總體大腸菌群(Total Coliform)糞便大腸菌(Fecal Coliform)沙門氏桿菌(Salmonella)腸球菌(Enterococcus)陽性格蘭氏(Gram Positive) / 陰性格蘭氏(Gram Negative)淋病奈瑟菌(Neisseria Gonorrhea)A組鏈球菌 (Group A Streptococcus)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus Aureus)

 

測試原理:
細菌測試卡以螢光為基礎,當由特定標靶生物酶水解過程中,會產生的藍色/白色的螢光,或需要時當加入試劑B(彩色顯影劑)則會顯示紫色/藍色。

 

性能特點:
細菌測試卡檢測了超過500個菌株,與傳統的生化測試相比具有大於99%的相關性。

 

試劑盒內容:(請參考表1. 份量足夠做48次測試)
1瓶試劑A (緩衝劑)、1瓶試劑B (彩色顯影劑,如果需要)、12 EZTest測試卡(每張卡上有4個檢測點)、1份產品說明書

 

自備材料棉簽,注射針,小木棒,正負菌株,長波紫外線燈(~360nm)

 

特別注意事項:
對存活細菌的危害應特別小心。測試前後請勿觸摸濾膜。請將測試卡消毒後再丟棄。

 

變質警告:
請勿使用已超過有效期限的策識卡,如果濾膜不再是白色會導致結果無效。

 

儲存條件:
所有的材料都可以儲存在室溫下(避免陽光直射)。冷藏亦不影響測試。

 

使用品質管制當使用測試卡,每次應進行檢查與陽性和陰性對照,使用一個已知的庫存標靶生物,及另一個不是標把生物的細菌菌株。理想的情況下陪養的細菌不應超過18小時,和表1中規定的細菌培養板上生長,否則有效的細菌酶可能不會產生。

 

測試步驟:
建議使用在表1中指定的細菌培養板培養細菌。其他類型的生長介質可能會使得測試卡無法測試到生物體標靶酶。理想情況下的菌株應生長14至18小時之後再植入測試卡。如經過24個小時的生長的大多數細菌會進入低酶的靜止狀態而影響測試結果。如果對菌株培養24小時以後測試的陰性結果有所懷疑,請重複測試在14到18小時培養出的細菌。(註:培養溫度 - 糞大腸菌群是44oC,所有其他類型的細則為38.5oC。)

1、選擇一個測試點作為控制點,其餘測試點作為樣本點或正對照。加入1滴試劑A在控制點,以及每個樣品點的濾膜區。 
2、從培養皿中選取菌株型態類似於目標生物體,以接種環,棉簽,或木棒輕取他們的頂部,塗抹在樣本點的濾膜上。 
將接種卡擱置在室溫下5-10分鐘。根據表1選擇步驟(A)(B): 
(A)紫外線燈測試法(見表1)
3、在~360nm的波長紫外線光下看測試卡。樣品點上的菌株在藍色背景下有螢光顯示是為陽性(見表1),樣品點上 無螢光顯示的菌株為陰性(與控制點相似)。陽性測試結果表示是目標生物。顯示陽性的螢光在樣品點上應可停留24小時。 
(B)顏色測試法(見表1)
3、加入1滴試劑B在控制點,以及每個樣品點的濾膜區。 
4、如樣品點的菌株上或周圍立即顯示藍或紫色,這說明是目標生物測試結果是陽性。如樣品點無藍或紫色顯示則是陰性結果。添加試劑B後,必須在1分鐘內讀測試結果。否則測試結果可能無效。如果自色或藍色顯示在控制點上,請重新測試。

 

測試侷限性:
偶爾某些微生物物種可能會產生極少量的標靶酶,因而導致培養菌株的陽性測試結果。但這是極為罕見的。 
品管技術控制注意事項: 測試卡檢測的細菌酶,可能會溶解在液體中。連續稀釋細菌可能無法達到陽性測試結果。

 

PS: 點圖看大圖

 

培養基索引表

B = 血平板培養基(Blood Agar)                 

M = 麥氏細菌培養基(MacConkey Agar)
E = 腸球菌培養基(Enterococcus Agar)       

Sal = 沙門氏桿菌培養基(鮮綠)(Salmonella agar, w/brilliant green)
GN = 陰性革蘭氏培養基(Gram Negative Agar)    

EC = 大腸桿菌培養基(E. coli agar)
LT = 月桂胰蛋白培養基(Lauryl Tryptose Agar)    

CH = 巧克力培養基(Chocolate Agar)
S. Sal = 選擇性沙門氏桿菌培養基(Oxoid)(Selective Salmonella Agar, Oxoid)
110 = 陽性凝固酶的金黃色葡萄球菌培養基(Staphylococcus Aureus Oagulase Positive)